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瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染有什么區(qū)別

作者:上海峰志 時(shí)間:2021-04-12 10:23:51瀏覽2945 次

信息摘要:

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是一種外源基因不整合到真核細(xì)胞基因組中的轉(zhuǎn)染類型唧席。因此擦盾,外來基因不會(huì)經(jīng)過幾代細(xì)胞嘲驾。此外,這種類型的轉(zhuǎn)染僅允許在短時(shí)間內(nèi)表達(dá)外源基因迹卢。另一方面辽故,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是另一種類型的轉(zhuǎn)染,其中外源基因整合到真核細(xì)胞的基因組中腐碱。因此誊垢,外源基因會(huì)經(jīng)過幾代細(xì)胞。此外症见,外源基因的表達(dá)發(fā)生在更長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)喂走。因此,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之間的主要區(qū)別在于將外源基因整合到真核細(xì)胞的基因組中谋作。

瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染有什么區(qū)別

瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之間的主要區(qū)別在于芋肠,在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染中,外源基因不整合到基因組中遵蚜,而在穩(wěn)定轉(zhuǎn)染中帖池,外源基因整合到基因組中。 此外吭净,基因表達(dá)在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染中發(fā)生的時(shí)間很短睡汹,而基因表達(dá)在穩(wěn)定轉(zhuǎn)染中發(fā)生較長(zhǎng)的時(shí)間,因?yàn)橥庠椿蚪?jīng)過幾代寂殉。  

瞬時(shí)和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是將外來遺傳元件轉(zhuǎn)染成真核細(xì)胞的兩種方法囚巴。一般來說,這兩種類型的轉(zhuǎn)染在生物技術(shù)中都有重要的應(yīng)用友扰。 

什么是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染 

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是一種轉(zhuǎn)染彤叉,其中外源基因進(jìn)入細(xì)胞但不整合到基因組中。因此焕檬,外來基因不會(huì)在真核細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制姆坚。因此,它會(huì)隨著時(shí)間的推移而降解实愚,同時(shí)通過細(xì)胞分裂稀釋兼呵。瞬態(tài)轉(zhuǎn)導(dǎo)的主要特征是它只允許短期基因表達(dá)。

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圖1:GFP融合蛋白瞬時(shí)轉(zhuǎn)染到S2細(xì)胞中

此外腊敲,一般來說击喂,用于轉(zhuǎn)染基因的載體也具有報(bào)告基因,可以監(jiān)測(cè)真核細(xì)胞內(nèi)外源基因的表達(dá)碰辅。此外懂昂,報(bào)告基因允許監(jiān)測(cè)細(xì)胞內(nèi)外源基因的存在。 

什么是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是另一種類型的轉(zhuǎn)染没宾,其中外源基因通過整合到染色體或染色體外表觀體中并入真核細(xì)胞的基因組凌彬。因此沸柔,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的主要特征是它允許外源基因代代相傳。此外铲敛,由于整合到基因組中褐澎,外源基因在細(xì)胞系內(nèi)持續(xù)更長(zhǎng)的時(shí)間,從而產(chǎn)生“高而穩(wěn)定的基因表達(dá)伐蒋。

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圖2:穩(wěn)定轉(zhuǎn)染

此外工三,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染中的整合構(gòu)建體包含可選擇的創(chuàng)客,以識(shí)別成功整合到基因組中的構(gòu)建體以及基因表達(dá)水平先鱼。 

瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的相似性 

瞬時(shí)和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是將外源基因引入真核細(xì)胞的兩種方法俭正。 外源基因的表達(dá)發(fā)生在這兩種方法中。 此外焙畔,這些方法在生物技術(shù)中具有不同的應(yīng)用掸读。 

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GFP在煙草葉片的瞬時(shí)表達(dá)(LUYOR-3415RG激發(fā)光源照射下發(fā)出綠色熒光

瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的區(qū)別 

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是指不參與將外源DNA整合到真核細(xì)胞基因組中的轉(zhuǎn)染方法,而穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是指參與將外源DNA整合到真核細(xì)胞基因組中的轉(zhuǎn)染方法宏多。 因此寺枉,這解釋了瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之間的主要區(qū)別。

檢測(cè)所需的時(shí)間:瞬時(shí)轉(zhuǎn)染檢測(cè)需要3-4周才能完成绷落,而穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染需要12-18周才能完成。 

遺傳變化:真核細(xì)胞中的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染不會(huì)改變始苇,而穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染會(huì)在真核細(xì)胞中產(chǎn)生性的遺傳變化砌烁。 

傳給后代: 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染不允許外源DNA代代傳遞,而穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染允許外源DNA代代相傳催式。 

基因表達(dá)周期:瞬時(shí)轉(zhuǎn)染允許基因表達(dá)短時(shí)間長(zhǎng)達(dá)24至96小時(shí)函喉,而穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染允許基因表達(dá)更長(zhǎng)的時(shí)間。 

表達(dá)式級(jí)別:雖然瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的表達(dá)水平相對(duì)較低荣月,但穩(wěn)定轉(zhuǎn)染具有高而穩(wěn)定的表達(dá)管呵。 

成本:瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之間的另一個(gè)區(qū)別是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染相對(duì)便宜,而穩(wěn)定轉(zhuǎn)染昂貴哺窄。 

應(yīng)用 

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染對(duì)于短期基因表達(dá)研究(包括小規(guī)模蛋白質(zhì)生產(chǎn)和基因敲低測(cè)定)非常重要捐下,而穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染對(duì)于長(zhǎng)期基因調(diào)控、大規(guī)模蛋白質(zhì)生產(chǎn)萌业、穩(wěn)定細(xì)胞系的產(chǎn)生坷襟、基因治療等非常重要。 

結(jié)論 

簡(jiǎn)而言之生年,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是一種外源基因不整合到真核細(xì)胞基因組中的轉(zhuǎn)染類型婴程。因此,外來基因不會(huì)經(jīng)過幾代細(xì)胞抱婉。此外档叔,這種類型的轉(zhuǎn)染僅允許在短時(shí)間內(nèi)表達(dá)外源基因桌粉。另一方面,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是另一種類型的轉(zhuǎn)染衙四,其中外源基因整合到真核細(xì)胞的基因組中铃肯。因此,外源基因會(huì)經(jīng)過幾代細(xì)胞届搁。此外缘薛,外源基因的表達(dá)發(fā)生在更長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)。因此卡睦,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之間的主要區(qū)別在于將外源基因整合到真核細(xì)胞的基因組中宴胧。

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