?GFP手電筒用于轉(zhuǎn)基因研究的熒光標(biāo)記

GFP手電筒用于哺乳動(dòng)物轉(zhuǎn)基因研究的熒光標(biāo)記

為了確定熒光蛋白在眼睛中的可見(jiàn)性，我們使用了手持便攜式雙熒光手電筒下檢查了轉(zhuǎn)基因小鼠泣矛。32 行中有 27 行（84%）在便攜式GFP手電筒下激發(fā)后顯示出可見(jiàn)熒光（圖 2A）疲眷。這些眼睛標(biāo)記在便攜式長(zhǎng)波紫外線(xiàn)燈LUYOR-3280UV下也可見(jiàn)，如前所述乳蓄，使用無(wú)處不在的熒光標(biāo)記咪橙。不同線(xiàn)條之間的熒光強(qiáng)度不同虚倒，只有在暗室中激發(fā)后才能看到zui暗的線(xiàn)條美侦，即使沒(méi)有激發(fā)，在室內(nèi)光線(xiàn)下也能看到zui亮的線(xiàn)條（圖 2B）魂奥。我們還在黑色和刺鼠背景上劃了一些線(xiàn)菠剩，以分析色素如何影響熒光眼標(biāo)記的可視化。色素的存在降低了熒光強(qiáng)度（圖 2B）耻煤。盡管如此具壮，即使房間燈打開(kāi)准颓，在刺鼠和黑色背景中仍然很容易看到高和中 EGFP 和 tdTomato 線(xiàn)。然而棺妓，低表達(dá)的報(bào)告線(xiàn)在有色小鼠中是微弱的攘已，盡管它們?cè)诤诎档姆块g中仍然可以檢測(cè)到。因此怜跑，這些記者可用于色素和非色素小鼠样勃。重要的是，我們已經(jīng)將這些品系維持了許多代（某些品系中 > 25 代）性芬，并且我們沒(méi)有觀察到熒光標(biāo)記隨著時(shí)間的推移而失活峡眶。因此，可以從一代到下一代始終如一地跟蹤眼睛標(biāo)記熒光植锉。

GFP手電筒和RFP手電筒照射效果對(duì)比：

鏡頭中表達(dá)的各種熒光蛋白可以在手持轉(zhuǎn)基因熒光手電筒照射下可直接觀察辫樱。使用GFP手電筒可以看到五個(gè)熒光眼標(biāo)記，而使用RFP手電筒只能看到 mOrange俊庇、tdTomato 和 mPlum狮暑。(B) EGFP 和 tdTomato 標(biāo)記表達(dá)在轉(zhuǎn)基因系 (低、中辉饱、高) 之間變化心例。插圖顯示 EGFP “高”線(xiàn)在無(wú)激發(fā)的室內(nèi)光下可見(jiàn)。EGFP“中”和 tdTomato“高”轉(zhuǎn)基因系也顯示在有色（Agouti鞋囊，黑色）背景中。請(qǐng)注意瞎惫，熒光眼標(biāo)記的可見(jiàn)性在有色背景中會(huì)降低溜腐。

GFP手電筒：

GFP手電筒又叫熒光蛋白觀察手電筒，英文名：GFP flashlight瓜喇，GFP torch挺益，GFP手電筒是通過(guò)發(fā)出藍(lán)光或紫外光激發(fā)動(dòng)植物體內(nèi)發(fā)熒光蛋白發(fā)光，通過(guò)專(zhuān)用的熒光蛋白觀察眼鏡乘寒，操作者就能夠直接觀察到綠色熒光蛋白的表達(dá)效果望众，是近幾年才上市的一款便攜式激發(fā)光源，是做轉(zhuǎn)基因研究不需要熒光顯微鏡就能觀察熒光的方便快捷的工具伞辛。

上圖：LUYOR-3280 GFP手電筒

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