熒光蛋白為什么被用作熒光標(biāo)簽?
因?yàn)闊晒獾鞍撞坏梢詷?biāo)記固定細(xì)胞及活細(xì)胞中的蛋白咪辱,還可以標(biāo)記不同的細(xì)胞類型振劳,甚至可以標(biāo)記亞細(xì)胞器。熒光蛋白因?yàn)轭伾r艷油狂,圖像直觀历恐,不需要化學(xué)染色和底物庐杨,是活細(xì)胞分析的理想選擇。它常用于追蹤啟動子活性夹供、產(chǎn)生穩(wěn)定細(xì)胞系灵份、標(biāo)記細(xì)胞或細(xì)胞器用于體內(nèi)成像等。
怎么選擇合適的熒光蛋白做標(biāo)簽哮洽?
熒光蛋白作為熒光標(biāo)簽用于實(shí)驗(yàn)研究要選擇適合的填渠,不是任何一種都可以。
1)要考慮你選擇的這這個熒光蛋白的熒光顏色和你的本體顏色有大的區(qū)別鸟辅,而熒光蛋白被激發(fā)后的顏色是由其發(fā)射波長決定的氛什,激發(fā)它發(fā)出熒光也要選擇正確的激發(fā)光源波長。
2)如果做多重實(shí)驗(yàn),就必須確保這幾種熒光蛋白的發(fā)射波長不重疊匪凉。
3)另外要考慮實(shí)驗(yàn)的對象枪眉,如果是體外實(shí)驗(yàn)就無所謂,大部分波長都可以再层,但如果是體內(nèi)研究如小動物成像,要選擇那些在遠(yuǎn)紅外區(qū)的長波贸铜,它能有效穿透身體組織,發(fā)揮作用聂受。
4)不同熒光蛋白適用于不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模喝缬械倪m合標(biāo)記細(xì)胞或細(xì)胞器蒿秦,追蹤啟動子活性,有的適合構(gòu)建融合蛋白(蛋白定位研究和產(chǎn)生穩(wěn)定的細(xì)胞系用于長期培養(yǎng))蛋济,有的適合作為目的蛋白轉(zhuǎn)錄和翻譯的指示劑棍鳖,有的適合三色分析,如黃碗旅、綠渡处、紅三色熒光蛋白
上圖:GFPfinder-2101RB熒光手電筒篩選GFP陽性的小鼠(圖片轉(zhuǎn)自https://www.xepu.cn )
熒光蛋白激發(fā)光源都有哪些?
熒光蛋白在激發(fā)光源的激發(fā)下才能發(fā)出熒光進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的觀測及研究祟辟。不同的熒光蛋白激發(fā)光源不一樣医瘫,需要根據(jù)其激發(fā)波長選擇合適的激發(fā)光源。上海峰志儀器有限公司擁有多種熒光蛋白激發(fā)光源川尖,有單波長激發(fā)光源登下,有雙波長激發(fā)光源,也有多波長激發(fā)光源叮喳,另外樣式可根據(jù)應(yīng)用場景選擇手電筒式被芳、手持式、桌面式等馍悟。
熒光蛋白激發(fā)燈用于激發(fā)熒光蛋白發(fā)出熒光畔濒,研究人員通過觀測熒光并記錄以實(shí)現(xiàn)相應(yīng)的研究。熒光蛋白激發(fā)燈作為激發(fā)重要的一個工具該怎么選锣咒,上海峰志儀器有限公司教你3步選好:
先看熒光蛋白
不同熒光蛋白的激發(fā)波長是不一樣的侵状,就算是同系列的熒光蛋白佳激發(fā)波長也是不一樣的赞弥。首先要了解被激發(fā)的熒光蛋白激發(fā)波長是多少?再選擇這個波長的激發(fā)燈趣兄,這樣激發(fā)出的熒光才足夠亮且穩(wěn)定绽左。
用于什么場景
不同用戶對于熒光蛋白的應(yīng)用是不一樣的,如:種子篩選艇潭、植物愈傷組織觀測拼窥、轉(zhuǎn)基因驗(yàn)證、細(xì)胞的運(yùn)動……針對不同的使用場景需要的激發(fā)燈樣式不一蹋凝,照射面積不一……
熒光蛋白激發(fā)燈廠家
確定了以上2步就差不多做好了功能選項(xiàng)鲁纠,第三部就是看熒光蛋白激發(fā)燈廠家,通過售前鳍寂、質(zhì)量改含、價格、服務(wù)迄汛、技術(shù)……綜合選擇
常見熒光蛋白激發(fā)波長如下:
1)紅色熒光蛋白RFP:激發(fā)波長532nm(綠光),發(fā)射波長588nm捍壤;
2)綠色熒光蛋白GFP:激發(fā)波長為 488 nm(藍(lán)光或紫光),發(fā)射波長507 nm;
3)藍(lán)色熒光蛋白BFP: 激發(fā)波長在400nm(紫)左右隔心,發(fā)射波長在450nm左右白群;
4)黃色熒光蛋白YFP: 大激發(fā)波長為514 (綠光)nm,大發(fā)射波長為527 nm硬霍。
上海峰志儀器有限公司專注熒光檢測燈20年,銷售的美國路陽和析浦科學(xué)儀器的熒光蛋白激發(fā)光源有單光源笼裳、雙光源唯卖、多光源可選。熒光蛋白激發(fā)燈樣式從便攜手電式到大面積桌面式都有躬柬,研發(fā)的光學(xué)透鏡使其光照度超過同條件的其他檢測燈拜轨,另外也可根據(jù)用戶實(shí)際需求進(jìn)行定制。
上圖:GFPfinder-2101RB熒光手電筒
上圖:LUYOR-3415RG雙波長熒光蛋白激發(fā)光源
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