觀察綠色熒光蛋白的儀器叫什么?
能夠激發(fā)綠色熒光蛋白的發(fā)出熒光的儀器叫熒光蛋白激發(fā)光源桐经,又叫熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈毁兆,熒光觀察手電筒,有便攜式熒光蛋白激發(fā)光源阴挣、臺(tái)式熒光蛋白激發(fā)光源等多種款式气堕。
LUYOR-3415T手持式熒光蛋白激發(fā)光源可檢測(cè)轉(zhuǎn)GFP、eGFP畔咧、tdtomato茎芭、cherry、dsred誓沸、dapi梅桩、hoechst、cfp拜隧、bfp宿百、yfp、venus洪添、lucife等多種熒光蛋白的表達(dá)犀呼。
觀察綠色熒光蛋白的儀器的原理是什么?
觀察綠色熒光蛋白的儀器又叫熒光蛋白激發(fā)光源薇组,這種便攜式熒光蛋白激發(fā)光源通過(guò)內(nèi)部大功率led發(fā)出的激發(fā)光激發(fā)熒光蛋白發(fā)光,觀察人員通過(guò)熒光觀察眼鏡觀察到熒光蛋白的熒光坐儿。
觀察綠色熒光蛋白的儀器有哪些律胀?
能夠激發(fā)綠色熒光蛋白的發(fā)出熒光的主要有熒光顯微鏡、熒光體視顯微鏡貌矿、便攜式熒光蛋白激發(fā)光源炭菌、臺(tái)式熒光蛋白激發(fā)光源等產(chǎn)品。熒光顯微鏡需要對(duì)觀察的目標(biāo)進(jìn)行切樣觀察逛漫,而手持的便攜式熒光蛋白激發(fā)光源無(wú)需破壞觀察目標(biāo)可以直接觀察黑低,特別是觀察熒光蛋白在種子、愈傷、葉片等的表達(dá)克握,非常方便蕾管,佩戴上熒光觀察眼鏡,打開(kāi)熒光蛋白激發(fā)光源的開(kāi)關(guān)就可以直接觀察到熒光表達(dá)的效果菩暗。
傳統(tǒng)的熒光顯微鏡觀測(cè)熒光蛋白有很多局限性掰曾,上海峰志儀器有限公司代理銷售的美國(guó)路陽(yáng)生產(chǎn)的便攜式熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈給轉(zhuǎn)基因研究工作者帶來(lái)了便捷性,無(wú)需取樣停团,打開(kāi)觀測(cè)燈直接照射熒光蛋白旷坦,肉眼就能清晰看到熒光蛋白在葉片、愈傷佑稠、種子秒梅、菌落等載體上的表達(dá)。無(wú)論是綠色熒光蛋白舌胶、黃色熒光蛋白或紅色熒光蛋白捆蜀,一臺(tái)觀測(cè)燈就能直接觀測(cè)2種熒光蛋白的表達(dá)。現(xiàn)上海峰志儀器有限公司技術(shù)工程師針對(duì)綠色熒光蛋白的觀測(cè)原理辆琅、幾種觀測(cè)方法介紹如下:
綠色熒光蛋白(GFP):
綠色熒光蛋白GFP吸收的光譜峰值為395nm(紫外)漱办,并有一個(gè)峰值為470nm的副吸收峰(藍(lán)光);發(fā)射光譜峰值為509nm(綠光)婉烟,并帶有峰值為540nm的側(cè)峰娩井。雖然450~490nm只是GFP的副吸收峰,但由于該激發(fā)光對(duì)細(xì)胞的傷害小似袁,因此通常多使用該波段光源(多為488nm)洞辣。GFP熒光極其穩(wěn)定,在激發(fā)光照射下昙衅,GFP抗光漂白能力比熒光素強(qiáng)扬霜,特別是在450~490nm藍(lán)光波長(zhǎng)下穩(wěn)定。類似的而涉,GFP融合蛋白的熒光靈敏度遠(yuǎn)比熒光素標(biāo)記的熒光抗體高著瓶,抗光漂白能力強(qiáng),因此適用于定量測(cè)定與分析啼县。由于GFP熒光的產(chǎn)生不需要任何外源反應(yīng)底物材原,因此GFP作為一種廣泛應(yīng)用的活體報(bào)告蛋白,其作用是任何其它酶類報(bào)告蛋白無(wú)法比擬的季眷。但因?yàn)镚FP不是酶余蟹,熒光信號(hào)沒(méi)有酶學(xué)放大效果,因此GFP靈敏度可能低于某些酶類報(bào)告蛋白子刮,比如螢火蟲(chóng)熒光素酶等威酒。
綠色熒光蛋白的激發(fā)觀察的幾種方法
1. 便攜式紫外光源
采用LUYOR-3410UV便攜式紫外光源(又叫高強(qiáng)度紫外線燈、黑光燈)觀察也非常方便,但如果觀察植物葵孤,植物葉片的葉綠色在紫外線燈下也會(huì)發(fā)出熒光担钮,對(duì)gfp發(fā)出的熒光也會(huì)產(chǎn)生干擾,另外佛呻,標(biāo)本長(zhǎng)時(shí)間在紫外光源照射下對(duì)GFP標(biāo)本組織也會(huì)造成破壞裳朋。
GFP熒光蛋白在煙草葉片上的表達(dá)
上圖:熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈照射煙草葉片,GFP熒光蛋白在煙草葉片上的表達(dá)
2. 便攜式GFP激發(fā)光源
采用LUYOR-3415RG便攜式GFP激發(fā)光源(又叫熒光蛋白觀測(cè)鏡吓著、熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈)是便捷鲤嫡、方便的觀察方法,因GFP在470nm有一個(gè)很高的吸收峰绑莺,采用 470nm激發(fā)光源能夠激發(fā)GFP發(fā)出明亮的綠色熒光暖眼,在觀察gfp熒光時(shí),因?yàn)榧ぐl(fā)光為強(qiáng)烈的藍(lán)色光線纺裁,佩戴專業(yè)的觀察眼鏡才能觀察到清晰的熒光信號(hào)诫肠。
3、熒光顯微鏡
熒光顯微鏡: 熒光顯微鏡是以紫外線為光源欺缘, 用以照射被檢物體栋豫,使之發(fā)出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置谚殊。熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收丧鸯、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等嫩絮。 細(xì)胞中有些物質(zhì)丛肢,如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光剿干;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光蜂怎,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光置尔,熒光顯微鏡就是對(duì)這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一杠步。目前在常用的方法就是采用熒光顯微鏡觀察,熒光顯微鏡在實(shí)驗(yàn)室普及榜轿。
但熒光顯微鏡的缺點(diǎn)是需要取樣才能觀察幽歼,如果樣本過(guò)大,無(wú)法放置在熒光顯微鏡上面差导,需要破壞樣本進(jìn)行取樣。 觀察植物葉片需要摘取葉片才能觀察猪勇。有時(shí)候觀察組培苗设褐,組培苗在組培瓶里面無(wú)法取出,就無(wú)法在熒光顯微鏡下觀察,熒光顯微鏡在觀察熒光時(shí)候還是有很多的局限性助析。
總之犀被,如果要激發(fā)熒光蛋白的熒光,觀測(cè)熒光蛋白的表達(dá)效果外冀,LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈是相對(duì)理想的觀測(cè)工具寡键,上海峰志儀器有限公司銷售的LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈檢測(cè)轉(zhuǎn)綠色熒光蛋白(GFP)基因、紅色熒光蛋白(DsRed)雪隧;檢測(cè)基因植物:水稻西轩、小麥、玉米脑沿、大豆藕畔、棉花、擬南芥庄拇;檢測(cè)轉(zhuǎn)GFP注服、DsRed基因動(dòng)物:小鼠、兔子措近、猴子等溶弟;檢測(cè)轉(zhuǎn)GFP、DsRed基因微生物:細(xì)菌瞭郑、真菌辜御、酵母等檢測(cè)GFP、DsRed基因組織特異性表達(dá)凰浮。上海峰 志儀器為美國(guó)路陽(yáng)授權(quán)代理商我抠,現(xiàn)貨供應(yīng)美國(guó)路陽(yáng)的LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈。
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