UCL-3200紫外交聯(lián)儀
美國路陽公司(LUYOR)的UCL-3200/3500紫外交聯(lián)儀是安裝6根短波254nm紫外線燈管的短波紫外交聯(lián)儀财松,設(shè)計(jì)實(shí)用,用途廣泛纱控。采用智能微處理控制系統(tǒng)和實(shí)時(shí)紫外監(jiān)測系統(tǒng)辆毡≌遥可以更快、更的安全地得到可靠無誤的結(jié)果胚迫,減少無須的調(diào)整時(shí)間喷户,不必要的重復(fù)過程和不期望的樣品污染。美國路陽公司(LUYOR)的UCL-3500紫外交聯(lián)儀是使這些創(chuàng)新性儀器成為客戶需要的設(shè)備访锻。
UCL-3200紫外交聯(lián)儀的原理褪尝,在254nm波長的紫外線照射下核酸與蛋白質(zhì)產(chǎn)生共價(jià)鍵,核酸能鉚釘在硝酸纖維素膜上期犬,因此使用254nm的紫外交聯(lián)儀河哑,可以確保核酸交聯(lián)到尼龍膜上。
由于UCL-3200紫外交聯(lián)儀配置了一種紫外能量程序控制系統(tǒng)(Joules/cm2),即其中的時(shí)間積分儀連續(xù)檢測紫外光的照射龟虎。當(dāng)能量吸收值達(dá)到設(shè)定值時(shí)璃谨,照射將自動(dòng)停止。所以不管紫外光源強(qiáng)弱與否鲤妥、時(shí)間差異與否佳吞,照射循環(huán)均有很好的重復(fù)性。
UCL-3200紫外交聯(lián)儀是一種多用途的短波254mm紫外輻射系統(tǒng)主要用于將核酸交聯(lián)于膜上棉安。還可用于瓊脂糖凝膠中DNA的切割底扳、RecA突變篩選、嘧啶二聚體產(chǎn)生的部分限制性內(nèi)切酶消化贡耽、UV滅菌消除PCR污染等衷模。在紫外滅菌、聚合物紫外處理等方面也有應(yīng)用價(jià)值蒲赂。
UCL-3200/3500為254nm的短波紫外交聯(lián)儀
UCL-3200M/3500M為302nm的中波紫外交聯(lián)儀
UCL-3200L/3500L為365nm的長波紫外交聯(lián)儀
產(chǎn)品應(yīng)用
紫外線誘發(fā)的突變
膜交聯(lián)
生物分子交聯(lián)
紫外線劑量已校準(zhǔn)
下面表格為紫外交聯(lián)儀能量換算方法:
紫外交聯(lián)儀的UV能量單位換算公式如下:
能量單位: 焦耳(J)
光強(qiáng)的能量單位:J/m2 , mJ/ cm2阱冶,即單位面積上的光能量
1焦耳(J) = 1牛頓/米=1瓦特(W)/秒(S)
1J/cm2 = 1000mJ/ cm2 = 1000000uJ/ cm2
1J/m2 = 1000mJ/ m2 = 1000000uJ/m2
1J/m2 = 0.1mJ/ cm2
紫外線強(qiáng)度單位:mw/cm2和w/m2如何換算?
1W/m2=103 mW/m2 =106uW/m2
1W/m2 =1000mW/ 10000cm2 =0.1mW/cm2=100 uW/cm2
1 W/m2 = 0.1 mW/cm2
1 mW/cm2 =1000 uW/cm2 =10 W/m2
美國路陽UCL-3200紫外交聯(lián)儀產(chǎn)品特點(diǎn)
內(nèi)置紫外輻射計(jì)可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)測量
安全聯(lián)鎖裝置滥嘴,防止用戶意外暴露在紫外線下
能夠提供10 J / cm 2 的UVA木蹬,UVB或UVC
高度均勻的表面照明
尺寸緊湊,可容納有限的實(shí)驗(yàn)室空間
做紫外線輻照箱使用
UCL-3200提供接近均勻的UVC光氏涩,其均勻度誤差小于10% 届囚,UCL-3200具有UVC劑量的實(shí)時(shí)監(jiān)控功能有梆,以確笔羌猓可重復(fù)使用的劑量,而不受空間和時(shí)間的影響泥耀。
固定核酸到膜上
UCL-3200是一個(gè)微處理器控制的UV照射系統(tǒng)饺汹,專用于核酸與膜的連接,適用于Southern痰催,Northern兜辞,Dot和Slot Blot應(yīng)用迎瞧。它也可以用于紫外線和消除PCR污染。
微處理器控制的再現(xiàn)性
可編程微處理器一直監(jiān)控紫外線的發(fā)射逸吵。當(dāng)達(dá)到設(shè)定的能量時(shí)凶硅,輻照將立即停止。因此扫皱,可以補(bǔ)償由于紫外線燈管老化而導(dǎo)致的UV強(qiáng)度降低的影響足绅。
耐用性
不銹鋼輻射室和鏡面花紋鋁制紫外線反射板,確保紫外線的均勻性韩脑,腔體頂部的紫外線傳感器不易被污染氢妈。
易于使用
大型顯示器提供了一系列預(yù)定義的方法,使UCL-3200成為易于使用切功能強(qiáng)大的儀器段多,用于將核酸固定在膜上首量。編程的數(shù)據(jù)顯示在LED顯示屏上。
美國路陽UCL-3200紫外交聯(lián)儀技術(shù)數(shù)據(jù)
技術(shù)指標(biāo) | UCL-3200 | UCL-3200M | UCL-3200L | |
波長范圍 | 254nm | 302/312nm | 365nm | |
紫外線燈管 | 6 x 8瓦 | |||
編程 | 9組預(yù)設(shè)輻射能量值 | |||
能量 | 0.000 至 9.999 焦耳或 0.00 至 99.99 焦耳 | |||
時(shí)間 | 00.00 至 99.59 分鐘或 000.0 至 599.5 分鐘 | |||
溫度 | 15?C-35?C | |||
濕度 | 70%無凝結(jié) | |||
外殼表面溫度 | ≤30?攝氏度 | |||
啟動(dòng)時(shí)間 | <1秒 | |||
外部尺寸(長x寬x高) | 40厘米x 34厘米x 30厘米 | |||
內(nèi)部尺寸(長x寬x高) | 32厘米x 30厘米x 16厘米 | |||
重量 | 9公斤 | |||
功率 | 60w | |||
資質(zhì)認(rèn)證 | CE |
UCL-3200/3500快速操作指南
按照能量輻照:
按壓Program按鍵进苍,Energy led綠燈亮加缘,通過數(shù)字鍵盤輸入能量值,按Enter確定觉啊,按Star開始生百。
按照時(shí)間輻照:
按壓Program按鍵,Time led紅燈亮柄延,通過數(shù)字鍵盤輸入時(shí)間值蚀浆,按Enter確定,按Star開始搜吧。例如:輻照55分鐘15秒市俊,輸入:55.15即可。
9組預(yù)設(shè)方法:
能量預(yù)設(shè)置模式:
A: 按Program選擇能量模式滤奈,通過數(shù)字按鍵輸入能量值,單位是焦耳(例如10J)摆昧,按Enter按鍵,
B:再按preset(藍(lán)燈亮)蜒程,按Enter按鍵绅你,顯示屏顯示P.在數(shù)字按鍵選擇預(yù)置通道3(1-9).
使用預(yù)設(shè)能量值照射步驟:
A:按Program選擇能量模式,按Preset(preset燈亮)昭躺,再數(shù)字鍵盤上按存儲(chǔ)的通道數(shù)(3),顯示屏將顯示預(yù)設(shè)能量值(10J)
B:按start忌锯,開始照射。
時(shí)間預(yù)設(shè)值模式:
A:按Program]選擇時(shí)間模式领炫,(time)紅色led燈亮偶垮。通過數(shù)字按鍵輸入需要設(shè)置的時(shí)間1.11(以分鐘和十分之一分鐘為單位),按Enter。
B:再按Preset按鍵(preset燈亮)似舵,按Enter按鍵脚猾,顯示屏顯示P.在數(shù)字按鍵選擇預(yù)置通道3(1-9).
使用預(yù)設(shè)時(shí)間值照射步驟:
A:按Program選擇time模式,按Preset(preset燈亮)砚哗,再數(shù)字鍵盤上按存儲(chǔ)的通道數(shù)(3),顯示屏將顯示1.11
B:按Start龙助,開始照射。
時(shí)間設(shè)置說明:
XXX.X時(shí)候蛛芥,zui大輸入值為599.5分鐘泌参,599為599分鐘,0.5代表為5x1/10, 0.1代表為6秒鐘常空,XX.XX時(shí)候沽一,zui大輸入值為99.59分鐘。
如何設(shè)置小于60秒為單位的照射時(shí)間:
按Program選擇time模式漓糙,按小數(shù)點(diǎn)按鍵铣缠,再按要設(shè)置的秒數(shù),比如:要照射55秒昆禽,在鍵盤上輸入0.55即可蝗蛙。42秒,在鍵盤上輸入0.42即可醉鳖。如果是1分30秒捡硅,要輸入1.30,如果是1分45秒盗棵,要輸入1.45.
注意:小數(shù)點(diǎn)后面大只能選擇1-5, 6-9是無法輸入的壮韭。
紫外交聯(lián)儀的紫外線強(qiáng)度和能量換算
紫外能量換算:
1 J/cm2= 1,000 mJ/cm2= 1,000,000 uJ/cm2 = 10,000 J/m2
紫外強(qiáng)度換算:
1 W/cm2=1,000 mW/cm2= 1,000,000μW/cm2 = 10,000 W/m2
能量(mJ/cm2)=強(qiáng)度(mW/cm2)x 時(shí)間(秒sec)
常用轉(zhuǎn)膜能量:120000uJ/cm2 =120 mJ/cm2 =0.12 J/cm2
紫外交聯(lián)儀用于Southern印跡雜交
Southern印跡雜交是進(jìn)行基因組DNA特定序列定位的通用方法。其基本原理是:具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下纹因,可按堿基互補(bǔ)的原則特異性地雜交形成雙鏈喷屋。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支持物上瞭恰,經(jīng)干烤或者紫外交聯(lián)儀的紫外線照射固定屯曹,再與相對(duì)應(yīng)結(jié)構(gòu)的標(biāo)記探針進(jìn)行雜交,用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色惊畏,從而檢測特定DNA分子的含量 恶耽。
由于核酸分子的高度特異性及檢測方法的靈敏性,綜合凝膠電泳和核酸內(nèi)切限制酶分析的結(jié)果颜启,便可繪制出DNA分子的限制圖譜偷俭。但為了進(jìn)一步構(gòu)建出DNA分子的遺傳圖,或進(jìn)行目的基因序列的測定以滿足基因克隆的特殊要求农曲,還必須掌握DNA分子中基因編碼區(qū)的大小和位置社搅。有關(guān)這類數(shù)據(jù)資料可應(yīng)用Southern印跡雜交技術(shù)獲得驻债。
Southern印跡雜交技術(shù)包括兩個(gè)主要過程:一是將待測定核酸分子通過一定的方法轉(zhuǎn)移并結(jié)合到一定的固相支持物(硝酸纖維素膜或尼龍膜)上乳规,即印跡(blotting)形葬;二是固定于膜上的核酸與同位素標(biāo)記的探針在一定的溫度和離子強(qiáng)度下退火,即分子雜交過程暮的。該技術(shù)是1975年英國愛丁堡大學(xué)的E.M.Southern首創(chuàng)的笙以,Southern印跡雜交故因此而得名。早期的Southern印跡是將凝膠中的DNA變性后冻辩,經(jīng)毛細(xì)管的虹吸作用猖腕,轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上。印跡方法如電轉(zhuǎn)法恨闪、真空轉(zhuǎn)移法倘感;濾膜發(fā)展了尼龍膜、化學(xué)活化膜(如APT咙咽、ABM纖維素膜)等老玛。利用Southern印跡法可進(jìn)行克隆基因的酶切、圖譜分析钧敞、基因組中某一基因的定性及定量分析蜡豹、基因突變分析及限制性片斷長度多態(tài)性分析(RFLP)等。
紫外交聯(lián)儀為什么有人稱為DNA紫外交聯(lián)儀溉苛,核酸紫外交聯(lián)儀镜廉?
紫外交聯(lián)儀主要用于Northern和Southern印跡雜交實(shí)驗(yàn)中將DNA或RNA從凝膠轉(zhuǎn)移到尼龍膜后固膜。
Northern印跡雜交(Northern blot)愚战。這是一種將RNA從瓊脂糖凝膠中轉(zhuǎn)印到硝酸纖維素膜上的方法娇唯。DNA印跡技術(shù)由Southern于1975年創(chuàng)建,稱為Southern印跡技術(shù)寂玲,RNA印跡技術(shù)正好與DNA相對(duì)應(yīng)视乐,故被稱為Northern印跡雜交,與此原理相似的蛋白質(zhì)印跡技術(shù)則被稱為Western blot敢茁。
Southern印跡雜交是進(jìn)行基因組DNA特定序列定位的通用方法佑淀。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支持物上彰檬,經(jīng)干烤或者紫外線照射固定伸刃,再與相對(duì)應(yīng)結(jié)構(gòu)的標(biāo)記探針進(jìn)行雜交,用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色逢倍,從而檢測特定DNA分子的含量捧颅。
DNA是核酸的一種,核酸包括DNA和RNA较雕。核酸的功效與作用是合成蛋白碉哑、維持機(jī)體免疫反應(yīng)和抗氧化挚币,核酸是一種生物大分子,在蛋白質(zhì)的復(fù)制和合成中既儲(chǔ)存和傳遞遺傳信息的作用扣典,能夠維持機(jī)體正常的免疫反應(yīng)妆毕,具有一定抗氧化的作用,還能夠促進(jìn)細(xì)胞的分化以及影響生物合成贮尖,又能夠促進(jìn)身體營養(yǎng)的吸收和利用笛粘。
斑點(diǎn)雜交(dot blot)是指將待測的DNA變性后點(diǎn)加在硝酸纖維素膜(或尼龍膜、NC膜)上湿硝,用已標(biāo)記的探針進(jìn)行雜交薪前,洗膜(除去未接合的探針),放射自顯影关斜,判斷是否有雜交及其雜交強(qiáng)度示括,主要用于基因缺失或拷貝數(shù)改變的檢測。
狹縫斑點(diǎn)雜交(slot blot):也是廣義dot blot的一種痢畜。圓點(diǎn)的形狀因?yàn)辄c(diǎn)很小后期不利于光密度分析垛膝,并且孔不易清洗徹底。從點(diǎn)雜交角度來說裁着,狹縫與斑點(diǎn)印跡沒有區(qū)別繁涂,只是終印跡形狀不同。如果覺得自己樣品量不大二驰,擔(dān)心樣品不能填滿狹縫其實(shí)也不是問題扔罪,因?yàn)椴惶顫M狹縫也不影響雜交結(jié)果,多是狹縫長短不整齊桶雀,另外矿酵,通過稀釋樣品填滿狹縫以后再做雜交,后印跡雜交結(jié)果不受影響矗积。
紫外交聯(lián)儀英文:ultraviolet crosslinker簡稱:UV crosslinker