sfGFP熒光蛋白的激發(fā)光和發(fā)射光

sfGFP是superfolder GFP的縮寫雪隧，它是一種設(shè)計精良的折疊版本的GFP，對化學(xué)變性劑和極端溫度顯示更大的耐受力员舵。Superfolder GFP是2005年發(fā)表的一種基本（構(gòu)成熒光）綠色熒光蛋白脑沿，來源于Aequorea victoria。據(jù)報道马僻，它是一種非匙矗快速成熟的弱二聚體。Superfolder GFP源自Folding Reporter GFP韭邓，具有以下突變：S30R/Y39N/N105T/Y145F/I171V/A206V

superfolder GFP的激發(fā)光和發(fā)射光：

sfGFP的激發(fā)光是·485nm措近，發(fā)射光為510nm

Superfolder GFP EX：485nm，Superfolder GFP EM：510nm

superfolder GFP的激發(fā)光和發(fā)射光的光譜圖

eGFP和GFP的區(qū)別：

GFP（綠色熒光蛋白）是一種在藍(lán)光或紫外光下發(fā)出綠色光的蛋白質(zhì)女淑。它天然存在于水母維多利亞水母中瞭郑。GFP由238個氨基酸組成。GFP 的大小為 26.9 kDa鸭你。GFP 是分子生物學(xué)中的強(qiáng)大工具屈张，因為它具有內(nèi)在的熒光，沒有任何輔助分子袱巨。熒光是由于蛋白質(zhì)的連續(xù)氨基酸的共價重排阁谆。蛋白質(zhì)折疊后，主鏈原子 Ser65愉老、Tyr66 和 Gly67 在 O 2存在下形成高度共軛的平面對羥基苯亞甲基咪唑啉酮發(fā)色團(tuán). 晶體結(jié)構(gòu)研究表明场绿，發(fā)色團(tuán)填充在分子的 β-桶結(jié)構(gòu)的核心內(nèi)可防止其因順磁氧、水偶極子或順反異構(gòu)化而猝滅嫉入。此外焰盗，發(fā)色團(tuán)與相鄰分子的非共價相互作用增強(qiáng)了其光譜特性。

EGFP（增強(qiáng)型綠色熒光蛋白）是野生型 GFP 的變體咒林，相對于 GFP 具有更高強(qiáng)度的發(fā)射熬拒。它是個也是重要的 GFP 變體之一。兩個突變 F64L 和 S65T 在 37 °C 下產(chǎn)生具有更高折疊效率的 EGFP映九。有趣的是梦湘，由于 S65T 對 395 nm 峰的抑制，EGFP 在 ~490 nm 處具有單個激發(fā)峰，因為它調(diào)節(jié)附近 Glu222 的電離狀態(tài)捌议。另一方面哼拔，F(xiàn)64L 提高了 37 °C 時的折疊效率。重要的是瓣颅，EGFP 的密碼子序列針對在哺乳動物細(xì)胞中的表達(dá)進(jìn)行了優(yōu)化倦逐。

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