LUYOR-3415RG用于大豆根系轉化的檢測

LUYOR-3415RG用于大豆根系轉化的檢測

近日，華中農業(yè)大學在《new phytologist》期刊發(fā)表了文獻《The miR156b-GmSPL9d module modulates nodulation by targeting multiple core nodulation genes in soybean》剩燥，作者使用了美國路陽生產的便攜式雙波長熒光蛋白激發(fā)光源用于檢測大豆毛根的轉化慢逾。LUYOR-3415RG便攜式熒光激發(fā)光源能夠檢測動植物體內的熒光蛋白的表達。無需熒光顯微鏡灭红，通過熒光觀察眼鏡就能直接觀察熒光蛋白的表達侣滩。以下是文獻摘要，具體文獻全文鏈接在本文末尾变擒。

大豆是蛋白質的zui佳來源之一君珠，是人類和動物飲食的主食。由于大豆富含蛋白質娇斑，因此在發(fā)育和繁殖過程中策添，它對氮（N）的需求比其他作物高得多。大豆與土壤中固氮細菌建立了共生關系毫缆，這些細菌能夠轉化大氣中的二氮（N2）轉化為氨唯竹，這有助于滿足其高氮需求。作為交換苦丁，大豆植物為這些細菌提供碳水化合物和其他營養(yǎng)物質浸颓，以促進根瘤菌的生長和增殖。共生固氮不僅有利于提高大豆的產量，而且是增加耕地氮供應以提高其他谷類作物產量的有力手段产上。因此棵磷，共生固氮是與大豆作物產量和質量以及一般可持續(xù)農業(yè)相關的主要因素。

共生氮固定發(fā)生在大豆的指定根器官（例如根結節(jié)）中晋涣，該根瘤以根瘤菌為宿主仪媒。當土壤中的氮含量低時，大豆釋放異黃酮（例如染料木黃酮）以誘導根瘤菌產生點綴因子（NFs）谢鹊。NF被大豆NF受體（NFR1和NFR5）感知并觸發(fā)調節(jié)根瘤感染和結節(jié)器官發(fā)生的信號級聯(lián)反應算吩，其由一系列發(fā)育過程組成，包括根外皮質細胞的去分化佃扼，結節(jié)原始形成赌莺，結節(jié)出現(xiàn)和結節(jié)成熟。已經表明松嘶，根瘤菌感染和結節(jié)器官發(fā)生的發(fā)作是由結節(jié)信號通路介導的艘狭，在過去三十年中已經確定了許多關鍵成分。其中翠订，結節(jié)起始（NIN）巢音，一種RWP-RK轉錄因子和早期結節(jié)蛋白基因（例如ENOD40），是zui早確定的豆類結節(jié)所必需的調節(jié)因子尽超，包括大豆官撼。

LUYOR-3415RG用于大豆毛根轉化和重氮化芽孢桿菌接種

根據(jù)前面描述的方法，使用根瘤菌K599進行大豆毛根轉化以生成復合植物）似谁。對于根瘤菌接種傲绣，將轉基因復合植物移植到含有蛭石的花盆（10×10厘米）中，用Y. Wang等人描述的N-缺乏溶液灌溉巩踏。（2009）. 植物生長了1周的恢復期（16小時的光照秃诵，25°C和50%的相對濕度）。然后將植物接種在新制備的雙氮二元組菌株USDA110（OD）懸浮液中塞琼。600= 0.08）菠净。接種后28 d，對每個毛根或每個根系的結核數(shù)進行評分彪杉，并在PBS（pH 7.5）中對根或結節(jié)進行短暫沖洗毅往，立即在液氮中冷凍并儲存在-80°C下進行基因表達分析。對于miR156b/f-CRISPR/Cas9復合植株的表型分析派近，我們首先計算了復合植株每個毛根的結節(jié)數(shù)攀唯，然后提取DNA檢測出可選擇的標記條基因。通過Sanger測序驗證了推定的轉基因根系渴丸。對于GmSPL9d-CRISPR / Cas9根的表型分析侯嘀，我們使用便攜式熒光手電筒鑒定了轉基因毛茸茸的根（LUYOR-3415RG战坤，上海，中國）残拐。檢查了每個轉基因根的結節(jié)數(shù)量，并通過Sanger測序證實了轉基因根系的突變碟嘴。

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詳細介紹：便攜式熒光蛋白激發(fā)光源LUYOR-3415RG

文獻地址：https://doi.org/10.1111/nph.17899   

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